Biacore analysis of SN8 framework variants
SN8 FW variant . | Murine framework residues present . | Changes for stability in VL . | CDR-H3 seq . | Bivalent binding fold, Kdvariant / Kdchimera . | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
VL . | VH . | |||||||||||||||
4 . | 47 . | 48 . | 67 . | 69 . | 71 . | 73 . | 75 . | 78 . | 80 . | 28 . | 29 . | 94 . | 95 . | |||
SN8 graft | 71 | 73 | 78 | wt | 56 | |||||||||||
All vernier | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 1 | ||||
1 | 48 | 71 | 73 | 78 | wt | 9.4 | ||||||||||
2 | 47 | 71 | 73 | 78 | wt | 18 | ||||||||||
3 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 5.5 | |||||||
4 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 12 | ||||||||
5 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 3.5 | ||||||
6 | 48 | 67 | 71 | 73 | 78 | wt | 7.6 | |||||||||
7 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 3.5 | |||||||||
8 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.7 | ||||||||
9 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | 80 | wt | 1.8 | |||||||
10 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | wt | NA | |||||||
11 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | H3-10 | 0.6 | ||||||
12 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | H3-10 | 0.5 | ||||||||
13 | 47 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.8 | ||||||||
14 | 4 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.1 | ||||||||
15 | 4 | 47 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 0.8 | |||||||
16 | 4 | 48 | 67 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.6 | ||||||||
17 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.0 | |||||||
18 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | H3-10 | 0.4 | |||||||
19 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | E | H3-10 | NDB | |||||
20 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | N | H3-10 | NDB | |||||
21 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | E | H3-10 | NDB | |||||
22 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | N | H3-10 | NDB | |||||
23 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | E | H3-10 | 25 | ||||
24 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | N | H3-10 | NDB | ||||
25 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | E | H3-10 | NDB | ||||
26 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | N | H3-10 | NDB | ||||
27 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | H3-10 | |||||||
28 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | H3-10 | 0.8 | ||||||
29 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | N | H3-10 | Very weak | |||||||
30 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | A | H3-10 | 1.3 | |||||
31 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | H3-10 | 1.0 | |||||
32 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | H3-10 | 1.6 | |||||
33 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | A | H3-10 | Very weak | |||||
34 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | H3-10 | NDB |
SN8 FW variant . | Murine framework residues present . | Changes for stability in VL . | CDR-H3 seq . | Bivalent binding fold, Kdvariant / Kdchimera . | ||||||||||||
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VL . | VH . | |||||||||||||||
4 . | 47 . | 48 . | 67 . | 69 . | 71 . | 73 . | 75 . | 78 . | 80 . | 28 . | 29 . | 94 . | 95 . | |||
SN8 graft | 71 | 73 | 78 | wt | 56 | |||||||||||
All vernier | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 1 | ||||
1 | 48 | 71 | 73 | 78 | wt | 9.4 | ||||||||||
2 | 47 | 71 | 73 | 78 | wt | 18 | ||||||||||
3 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 5.5 | |||||||
4 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 12 | ||||||||
5 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | wt | 3.5 | ||||||
6 | 48 | 67 | 71 | 73 | 78 | wt | 7.6 | |||||||||
7 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 3.5 | |||||||||
8 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.7 | ||||||||
9 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | 80 | wt | 1.8 | |||||||
10 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | wt | NA | |||||||
11 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 75 | 78 | 80 | H3-10 | 0.6 | ||||||
12 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | H3-10 | 0.5 | ||||||||
13 | 47 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.8 | ||||||||
14 | 4 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.1 | ||||||||
15 | 4 | 47 | 48 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 0.8 | |||||||
16 | 4 | 48 | 67 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.6 | ||||||||
17 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | wt | 1.0 | |||||||
18 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | H3-10 | 0.4 | |||||||
19 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | E | H3-10 | NDB | |||||
20 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | N | H3-10 | NDB | |||||
21 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | E | H3-10 | NDB | |||||
22 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | N | H3-10 | NDB | |||||
23 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | E | H3-10 | 25 | ||||
24 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | N | H3-10 | NDB | ||||
25 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | E | H3-10 | NDB | ||||
26 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | N | H3-10 | NDB | ||||
27 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | H3-10 | |||||||
28 | 4 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | H3-10 | 0.8 | ||||||
29 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | N | H3-10 | Very weak | |||||||
30 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | A | H3-10 | 1.3 | |||||
31 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | H3-10 | 1.0 | |||||
32 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | S | H3-10 | 1.6 | |||||
33 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | A | H3-10 | Very weak | |||||
34 | 4 | 47 | 48 | 67 | 69 | 71 | 73 | 78 | E | H3-10 | NDB |
wt indicates wild type; N, asparagine; A, alanine; S, serine; E, glutamine; and NDB, no detectable binding.